Институт Медицинской Климатологии
Современные виды микроскопии.

Люминесцентная микроскопия основана на способности некоторых природных и синтетических соединений светиться под воздействием света. Некоторые структуры и вещества клеток обладают собственной (первичной) люминесценцией, другие получают такую способность при окрашивании особыми красителями. Объект освещают сине-фиолетовыми лучами или ультрафиолетом. Люминесцентная микроскопия позволяет изучать не только отдельные клеточные структуры, но и различать живые и мертвые клетки, в том числе в сложных природных пробах.

Конфокальная лазерная сканирующая микроскопия не требует обезвоживания объекта и позволяет наблюдать микроорганизмы в их естественном виде и даже в составе природных комплексов (биопленок, почвенных частиц, донных осадков). При этом достигается разрешение, сравнимое с люминесцентной микроскопией. Лазерный луч расщепляется с помощью специального зеркала и постепенно сканирует исследуемую поверхность, возбуждая флуоресценцию в ней. Испускаемый свет улавливается фотоумножителем. За один проход луча получается одно плоское изображение. Затем с помощью компьютера такие изображения складываются в трехмерную форму объекта.

Атомно-силовая микроскопия является разновидностью сканирующей зондовой микроскопии и используется для определения рельефа поверхности объекта с разрешением в десятки ангстрем. Она основана на регистрации отклонений частотных характеристик упругой консоли (кантилевера) с помощью лазерного луча, который отражается от внешней поверхности кантилевера и попадает на фотодетектор. В качестве зонда применяется наноразмерное острие, располагающееся на конце кантилевера. Появление падений или возвышенностей рельефа образца приводит к изменению силы, действующей на зонд, а значит, и изменению величины изгиба кантилевера. Наиболее универсальным способом атомно-силовой микроскопии, позволяющим работать с биологическими объектами, является полуконтактный режим, когда в нижнем полупериоде колебаний кантилевер касается поверхности образца. Результаты первичного сканирования в дальнейшем подвергаются математической обработке и расшифровке с помощью специального программного обеспечения.

Добавить комментарий